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乙二醇-双-(2-氨基乙基)四乙酸//EGTA/0732-10G分装 |
上海博华生物是一家专业的生物试剂供应商,为您提供PDHB 丙酮酸脱氢酶E1β亚单位抗体,详情咨询! |
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乙二醇-双-(2-氨基乙基)四乙酸//EGTA/0732-10G分装测量方法的确认在ISO 17025以及IS0导则34中均得到了重视。标准物质于定值前,应对前面所讲的定值模式的有效性以及每种定值方法的溯源性、准确度、精度、抗干扰能力等进行确认,证明其满足定值要求。elisa实验步骤:1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后立即进行检测。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体——聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。elisa试剂盒实验自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸
名称:乙二醇-双-(2-氨基乙基)四乙酸 品牌:AMRESCO Item Description:EGTA Code:0732-10G分装 级别:超纯级 CAS: Size: Shipping Temperature: Hazardous Shipping Charges Apply*: Hazard Label for Container*: UN#*: UNSPSC #: Shelf Life from Date of Manufacture**: Parent Category: Child Category: Grade:
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