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β-巯基乙醇/60-24-2/2-MERCAPTOETHANOL/0482-250ML |
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β-巯基乙醇/60-24-2/2-MERCAPTOETHANOL/0482-250MLelisa用于检测未知抗体的间接法:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照),于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。具有抗原结合部位,能与抗原分子上相应表位发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞,如正常的脾细胞、胸腺细胞、腹腔渗出细胞等,常选用腹腔渗出细胞,其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。抗血清收获后,加 1/万硫柳汞或 1/万的叠氮钠防腐,或加入等量的中性甘油,分装小瓶,置-20℃以下的低温保存,数月至数年内抗体效价无明显变化。注意避免反复冻融。
名称:β-巯基乙醇 品牌:AMRESCO Item Description:2-MERCAPTOETHANOL Code:0482-250ML 级别:生物技术级 CAS:60-24-2 Size:250ML Shipping Temperature:RT Hazardous Shipping Charges Apply*:Yes Hazard Label for Container*:TOXIC / COMBUSTIBLE / IRRITANT UN#*:2966 UNSPSC #:12352200 Shelf Life from Date of Manufacture**:4 years Parent Category:Chemicals and Reagents Child Category: Grade:BIOTECHNOLOGY GRADE
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相关知识>>>> 一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。1. 试剂 (1) 包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液): Na?CO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸馏水至1000ml单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体。 关键词: |
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