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磷酸化CREB-1抗体 |
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相关知识》》》 单抗特异性高,而且一旦制备成功就可以永续生产**的抗体,因而可以对其特异性进行系统、全面的验证,能广泛地应用于各种应用,并且*保证抗体的*性,是*的抗体“金标准"。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。多克隆抗体在特异性方面无法与单抗相比拟,而且即便是用相同抗原制备的不同批次的多抗也不能保证其*性,因而多抗在特异性、*性方面有很大局限。抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。 |
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