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Human Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit
包装:96T/48T 检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 保存:2-8℃,一年。
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相关知识>>>>>>> 试剂的准备 1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤: 参照说明书(具体说明书请发邮件::shkbsw) 灵敏度: 具体请查看说明书. 检测范围(RANGN): 具体请查看说明书. 结果判定: 试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15 阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为人Hp-IgM阴性 阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为人Hp-IgM阳性 操作注意事项 1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8. 加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 血浆: 应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。 尿液、胸腹水、脑脊液: 用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。 自备材料 1. 蒸馏水。 2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3. 振荡器及磁力搅拌器等。 |