培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制养料,一般含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等,有的还含有抗菌素、色素、激素和血清。培养基由于配制的原料不同、使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同;液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。 培养基培养方法: 1.配料 配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。 2.溶解 淀粉溶解:少量冷水调成糊状 加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边 加热边搅拌以防止烧焦。 3.调PH 用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。 4.过滤 滤纸或棉花进行过滤。 5.分装 一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。 (1)三角瓶 若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,zui多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。 (2)试管分装 液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度; 固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。 6.包扎 分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。 7.灭菌 按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养 基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。 8.摆斜面 灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。 9.贮存 培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。 |